Appartenance administrative :

Disciplines secondaires :

• Biologie Cellulaire

Responsable de l'équipe

Membres de l'équipe statutaire :

• BIARD Denis.Tél.: 01 46 54 87 32 courriel: denis.biard@cea.fr

• LE CHALONY Catherine. Tél.: 01 46 54 89 19 courriel: lechalon@dsvidf.cea.fr

• MICCOLI Laurent. Tél.: 01 46 54 87 47 courriel: laurent.miccoli@cea.fr

• REYES Oscar. Tél.: 01 45 64 90 72 courriel:oscar.reyes-alvarado@cea.fr

• PINON-LATAILLADE Ghislaine. Tél.: 01 46 54 70 41 courriel:ghislaine.lataillade@cea.fr

Les thèses en cours :

• Caractérisation de la réponse des cellules de mammifères aux rayonnements iosnisants. Rôle de certaines protéines nucléaires dans la mutagenèse radio induite, Emmanuelle DESPRAS, Directeur de thèse : Denis BIARD. Description du projet : Il s’agira de comprendre comment la protéine HsKin17 peut participer à la réponse cellulaire à une irradiation ionisante. Le matériel biologique utilisé sera des cellules tumorales humaines en culture, des fibroblastes humains normaux, et éventuellement des cellules de souris knock out pour un gène de réparation de l’ADN. Une corrélation pourra être faite entre des cellules ayant un phénotype p53 sauvage versus muté.On s’intéressera :(i)A l’évolution du taux protéique de HsKin17 (western blot, ELISA, cytométrie en flux) et à sa localisation sub cellulaire après irradiation (immunocytochimie, gel filtration). On mettra en évidence s’il s’agit d’une régulation transcriptionnelle ou traductionnelle (utilisation d’inhibiteurs). Une cinétique d’expression de HsKin17 endogène en fonction du temps (prolifération versus confluence) sera également entreprise.(ii)la répartition des cellules sur exprimant HsKin17 après irradiation dans les différentes phases du cycle cellulaire avec un intérêt particulier pour la phase G2 (cytométrie en flux). On essayera de mettre en évidence des partenaires protéines (immunoprécipitation).(iii)l’effet conjugué d’une irradiation ionisante et d’une sur expression de HsKin17 sur la réplication des vecteurs EBV comme modèle d’étude des réplicons génomiques.(iv)l’association (ou non) de HsKin17 sur les chromosomes des cellules après irradiation. (v)la fixation spécifique de HsKin17 sur des séquences particulières de l’ADN (approche de la technique TFCHIP ou transcription factor chromatin immunoprecipitation).Ce projet se fera en étapes selon les avancées actuelles de mes travaux.En outre, l’étudiant entreprendra une recherche bibliographique sur les perturbations du cycle cellulaire après une irradiation ionisante, et plus spécifiquement les composants moléculaires du blocage en G2.

• Caractérisation d’un nouveau système de signalisation de la présence des dommages de l’ADN dans les cellules humaines, Emilie Renaud. Directeur de thèse : Jaime F. ANGULO-MORA. Résumé: La protéine XPC humaine forme un complexe avec la protéine hHR23B, ce complexe peut reconnaître les lésions sur la molécule d'ADN et amorcer le processus de leur réparation. Fait intéressant, la protéine XPC interagit avec la centrine2, une autre protéine nucléaire avec un rôle vital pour la stabilité de la cellule. Ce travail de thèse cherche à caractériser la fonction biologique de la protéine XPC dans des cellules humaines et dans des cellules de souris à l'aide des cellules de mammifères dans laquelle le gène XPC est inactivé. L’utilisation des anticoprs dirigées contre des domaines précis de la protéine XPC et d’autres approches comme les puces à ADN, le FRET et la électrophorèse capillaire doit nous permettre de préciser le rôle particulier de la protéine XPC lors de la réponse de cellules de mammifères à différents agents génotoxiques (Masson et al., PNAS, 2003, 100, 2, 617-621).